PCR analýza: co je to? Jak vzít analýzu PCR

Nebylo to tak dávno vyvinuli spolehlivé, vysoce citlivou a rychlou metodu pro diagnostiku různých infekčních chorob u lidí. Takový způsob se nazývá „PCR analýza“. Co je to, co je jeho podstatou, co dokáže identifikovat mikroorganismy a jak to vzít si popíšeme v tomto článku.

Historie objevu

Vynalezl polymerázové řetězové reakce (PCR) je americký vědec Keri Myullis v roce 1983. Zpočátku, patentovaný způsob diagnózy podle „Cetus Corporation“, ve kterém pracoval a jeho tvůrce. Ale v roce 1992 všechna práva a patenty byly prodány firmě „Hoffman-La Roche.“ Za to, že se ukázalo, že podobné studie byly provedeny paralelně a byly hlášeny u jiných amerických biologů, jako jsou Elis Chen, David Edgar, John RRE. V roce 1980 se podílí na tomto problému a sovětských vědců A. Slyusarenko A. Kaledin a S. Gorodetsky. Proto, aby se zjistilo jediným vlastníkem autorských práv, nebylo možné. Mnoho vynikajících biochemici přispěly k rozvoji metod polymerázové reakce a CERN patentovat své inovace. V tomto okamžiku analýza PCR se provádí v průběhu speciálně vybavených laboratořích.

SHRNUTÍ PCR diagnostika

PCR analýza: co to je a jak to funguje? Podstata metody spočívá v tom, že pomocí speciální enzym DNA polymerázu in vitro ke zvýšení objemové specifické mikrobiální prostředí. K tomu opakovaně násobit dostupné DNA materiál. To znamená, že přítomnost patogenu ve vzorku množství se zvýší na úkor biochemické laboratoři manipulace, a bakterie nebude obtížné zjistit v mikroskopu.

Jak je studium materiálu?

Provést požadované analýzy:

• DNA templát;
• Primery materiál spojující konce fragmentu;
• termostabilní DNA polymeráza;
• chemikálie, zajištění správné funkce enzymů;
• tlumivý roztok, který k vytvoření vhodných podmínek pro růst a vývoj DNA materiálu nutné.

K provedení PCR pracovat 25-30 repetice složené ze tří kroků: denaturace, nasedání a prodloužení.

Pro analýzu polimezarnoy řetězovou reakci za použití speciálního přístroje - cykleru. Moderní zařízení umožňuje nainstalovat potřebné topení a chlazení trubek plán na odstranění chyby při stanovení diagnózy.

Kde podat žádost diagnózu?

Polimezarnoy řetězové reakce se používají v různých oblastech medicíny:

• Soudní použití se pro identifikaci genetického materiálu, jako jsou vlasy, sliny nebo krve;
• PCR analýza krve pomáhá genotypování, např. Pro detekci jednotlivých genetické osázené reakci na konkrétní léčivo;
• metodou set rodinných vazeb mezi lidmi;
• nejvyhledávanějších-PCR metoda se stala v lékařské diagnostice pro stanovení různých infekčních chorob.

Co infekce ukazuje PCR?

Tak přípravek již dlouho úspěšně použit PCR analýzu. Co se děje, jsme se již naučili. A některé patogeny mohou být detekovány s ním? PCR diagnostikována následující infekcí :

• hepatitida A, B, C;
• ureaplasmosis;
• kandidóza;
• chlamydie;
• mykoplazmózy;
• bakteriální vaginóza;
• infekční mononukleózy;
• trichomoniáza;
• HPV infekce;
• tuberkulóza;
• herpes infekce 1. a 2. typu;
• Infekce Helicobacter pylori;
• cytomegalovirus;
• záškrtu;
• salmonelóza;
• HIV infekce.

Také PCR metody jsou používány v diagnóze rakoviny.

Výhody způsobu

Diagnostické PCR má několik výhod:

1. Vysoká citlivost. Dokonce i jen několik molekul DNA mikroorganismu PCR analýza určuje přítomnost infekce. Pomáhá metodu pro chronické a latentní onemocnění vyskytující. Často se v takových případech, mikroorganismus je nekultivovaný jinými způsoby.
2. Za účelem zkoumání jakýkoliv vhodný materiál, jako je například slin, krve, pohlavní výběr, vlasy, epitelových buněk. Nejběžnější je krevní test a urogenitálního tampon PCR.

3. Nevyžaduje prodloužené rostoucích kultur. Automatizovaný proces diagnostiky umožňuje získat výsledky studie, po 4-5 hodinách.
4. Tato metoda je téměř zcela autentický. Zaznamenán pouze ojedinělé případy falešně negativní výsledek.
5. Schopnost identifikovat několik typů patogenů v jednom vzorku materiálu. To urychluje nejen celý proces diagnózy onemocnění, ale také výrazně snižuje náklady na materiál. Často lékař předepsal komplexní analýzu PCR. Cena průzkum, který se skládá ze stanovení šest patogenů, je asi 1500 rublů.

Doporučení pro přípravy na stanovení

Výsledky platná studie PCR je třeba testovat, na základě doporučení předběžných přípravků pro diagnózu:

1. Před dodáním slin zdržet se jídla a léčiva po dobu 4 hodin před odběrem materiálu. Bezprostředně před zákrokem, vypláchnout ústa převařenou vodou.
2. Výše uvedená pravidla musí být vedeny a při odběru vzorku z vnitřní strany tváře. Po opláchnutí se doporučuje provádět lehkou masáž na kůži uvolnit prostatického sekretu.
3. Moč se obvykle shromažďují doma. Chcete-li to provést, je nutné provést důkladné WC na genitáliích. Ve sterilní nádoby z plastické hmoty, je třeba shromáždit 50-60 ml moči. Je doporučeno, aby ženy vložte tampon do vagíny a muži co nejvíce vytáhnout kožní záhyb k zajištění čistoty materiálu. Nemůžete vzít materiálu během menstruace.
4. Na dodávku spermií zdržet pohlavního styku během 3 dnů před odběrem materiálu. Také lékaři doporučeno, aby upustila od užívání sauny a horké vany, alkohol a kořeněná jídla. Po dobu 3 hodin před analýzou, je nezbytné, aby se zdržela močení.
5. Předat urogenitální ostrost obrazu, například v případě, že analýza na chlamydie PCR, žen i mužů je doporučeno, že sexuální odpočinek po dobu 3 dnů. 2 týdny před analýzou nelze brát antibiotika. Po dobu jednoho týdne budete muset přestat používat intimních gelů, masti, vaginální čípky, sprchování. 3 hodiny před studie by měly zdržet močení. V průběhu menstruace plot materiál není provedeno, pouze 3 dnů po ukončení nanášení může trvat urogenitální rozmazání.

PCR v průběhu těhotenství

Čekací doba pro dítě, mnoho infekčních onemocnění, sexuálně přenosných nemocí, jsou velmi nebezpečné pro normální vývoj plodu. Pohlavně přenosné nemoci mohou vyvolat nitroděložní vývoj, potrat nebo předčasný porod, vrozené vady dítěte. Z tohoto důvodu je důležité, aby se v časném těhotenství screening PCR. Projít analýza je nutné při registraci - až 12 týdnů.

Plot materiál pochází z děložního hrdla s speciálními štětci. Postup je bezbolestný a nepředstavuje žádné nebezpečí pro dítě. Normálně během těhotenství analyzován pro metodu PCR Chlamydia, stejně jako ureaplasmosis, mykoplazmózy, cytomegaloviru, herpes, papilloma viru. Taková vyšetření komplex nazývá PCR 6.

PCR pro diagnózu HIV

Vzhledem k tomu, že metoda polymerázové řetězové reakce je velmi citlivé na změny v těle a podmínek diagnostiky, mnoho faktorů může mít vliv na výsledek. Proto PCR analýza pro infekce HIV, není spolehlivá metoda, jeho účinnost - 96 až 98%. Zbývající 2-4% testu dává falešně pozitivní výsledky.

Avšak v některých případech bez PCR diagnostiku HIV nemůže dělat. Obvykle se provádí na lidi s falešně negativních ELISA. Tyto údaje ukazují, že osoba dosud vyvinut protilátek proti viru a nelze zjistit bez zvýšení počtu násobku. To může být dosaženo tím, že provádí krevní test metody PCR.

Také potřebujeme, je diagnóza u dětí v prvním roce života, narodilo HIV pozitivním matkám. Tato metoda je jediný způsob, jak spolehlivě zjistit stav dítěte.

PCR pro diagnostiku hepatitidy

Polymerázová řetězová reakce způsob umožňuje detekci DNA viru hepatitidy A, B, C, předtím, než k tvorbě protilátek proti infekci nebo nástupu příznaků. Zvláště efektivní je PCR analýza na hepatitidu C, od 85% této choroby je asymptomatická a bez včasného ošetření stává chronickou.

Včasné rozpoznání patogenu pomůže vyhnout se komplikacím a dlouhodobou léčbu.

screening Integrovaný PCR

Komplexní PCR Analýza: Co je to? Tento screening metoda polimezarnoy řetězovou reakci, která zahrnuje stanovení současně několik druhů infekce: Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis, Candida, Trichomonas, cytomegalovirus, Ureaplasma urealitikum, herpes 1. a 2. typu, kapavka papilomaviru. Cena této diagnózy se pohybuje v rozmezí od 2000 do 3500 rublů. v závislosti na klinických, materiálů a zařízení, jakož i na druhu analýzy: kvalitativní nebo kvantitativní. Co je potřeba ve vašem případě - lékař rozhodne. V některých případech stačí jednoduše detekovat přítomnost patogenu v jiných odvětvích, jako je HIV, důležitou roli, kterou hrají kvantitativní titru. jen „PCR analýza 12“ v diagnostice všechny výše uvedené zkoušky patogeny.

Rozluštění výsledků analýzy

Transkripce PCR analýza je jednoduché. Existují pouze 2 index stupnice - „negativní“ „pozitivní“ a Po detekci patogenu může lékaři s 99% spolehlivostí tý potvrdit přítomnost choroby a zahájit léčbu pacienta. V kvantitativním způsobu stanovení infekce v odpovídajícím číslem indexu sloupec detekovaných bakterií budou specifikovány. Pouze lékař může určit rozsah onemocnění a předepsat potřebnou léčbu.

V některých případech, například při určení infekce HIV pomocí PCR, s negativním výsledkem, že je třeba pro další průzkum, který má potvrdit tyto údaje.

Kde se nechat vyšetřit?

Kde složit-PCR analýzu ve veřejném klinice nebo v soukromé laboratoři? Bohužel, v městské instituce zařízení medicínského a metody jsou často zastaralé. Proto je lepší dát přednost soukromých laboratoří s moderním vybavením a vysoce kvalifikovaných pracovníků. Kromě toho na soukromé klinice dostanete výsledky mnohem rychleji.

V Moskvě, mnoho soukromé laboratoře nabízejí PCR analýzu různých infekcí. Například v takových klinik jako „Vita“, „integrované Clinic“, „Šťastná rodina“, „Uro-Pro“, provádí PCR analýzu. cena průzkum je 200 rublů. pro stanovení patogen.

Je možno učinit závěr, že diagnóza infekčních chorob pomocí PCR ve většině případů je rychlý a spolehlivý způsob detekce patogenu v těle v časných stádiích infekce. Přesto, v některých případech, volit jiné metody diagnostiky. Určete potřebu takové studie, může být jen odborníkem. PCR analýza Dešifrování také vyžaduje profesionální přístup. Řiďte se přesně pokyny svého lékaře a nedávají své vlastní testy, které nejsou potřebné.