Ksantoproteinovaya reakce na protein: znaky a vzorec rovnice

Za účelem stanovení kvalitativní složení mnoha potravinách používaných ksantoproteinovaya reakci na bílkoviny. Přítomnost aromatických aminokyselin ve směsi se bude měnit v pozitivním barvy zkušebního vzorku.

Co je protein

To je také nazýváno protein, který je stavebním materiálem pro živé tělo. Proteiny udržení svalové hmoty, obnovení zraněné a mrtvé tkáně struktury různých orgánů, ať už jde o vlasy, kůži a vazy. S jejich účasti, produkuje červené krvinky, se řídí běžným provozem mnoha hormonů a buněk imunitního systému.

Jedná se o komplexní molekula, která je polypeptid, který má hmotnost větší než 6 ~ 10 ³ daltonů. Struktura proteinu tvořit aminokyselinových zbytků v velkého počtu spojené peptidovou vazbou.

Struktura proteinů

Charakteristickým rysem těchto látek ve srovnání s peptidy o nízké molekulové hmotnosti je, že vyvinuli trojrozměrné prostorové struktury, podporované účinky s různým stupněm přitažlivosti. Proteiny mají čtyři-strukturu. Pro každý z nich má své vlastní charakteristiky.

Jako základ primární organizace molekul Odvozená aminokyselinová sekvence, strukturu, která rozpoznává ksantoproteinovaya reakci na bílkoviny. Tato struktura je periodicky se opakující peptidová vazba -HN-CH-CO-, selektivní část radikály jsou vedlejší řetězce na aminokyseliny. Definují další vlastnosti látky jako celku.

Struktura Primární Protein je považován za dostatečně silné, to je vzhledem k přítomnosti silných kovalentních interakcí v peptidových vazeb. Tvorba dalších úrovní dochází v závislosti na vlastnostech uvedených v počáteční fázi.

Tvorba sekundární struktury je možné díky kroucení aminokyselinové sekvence ve spirále, ve kterých jsou vodíkové vazby vytvořené mezi závity.

Terciární stupeň organizace molekul vytvořen nanesením jednoho z spirály o ostatních fragmentů s výskytem všech možných spojení mezi nimi, s vodíkem, disulfid, kovalentní nebo iontové sloučeniny. Výsledkem je sdružení ve formě kuliček.

Prostorové uspořádání terciárních struktur s tvorbou chemických vazeb mezi nimi vede k vytvoření konečné podobě molekuly nebo kvartérní úrovni.

aminokyseliny

Způsobují chemické vlastnosti proteinů. Existuje asi 20 hlavních aminokyselin, které tvoří polypeptidy, v jiném pořadí. To také se označuje vzácné aminokarboxylové kyseliny ve tvaru hydroxyprolinu a hydroxylysin odvozený základní peptid.

Na znamení proteinu reakce uznání ksantoproteinovaya, přítomnost určitých aminokyselin poskytuje barevné změny činidel, což naznačuje přítomnost specifických struktur v jejich složení.

Jak se ukázalo, jsou karboxylové kyseliny, které se objevily, substituci atomu vodíku na aminoskupině.

Příklad struktura molekuly mohou sloužit strukturální vzorec glycin (HNH- HCH- COOH) jako nejjednodušší aminokyseliny.

V tomto případě je jeden z atomů vodíku CH ₂ -, může být nahrazen uhlíkem již radikální která obsahuje benzenový kruh, amino, sulfo, karboxyskupinu.

Co ksantoproteinovaya reakce

Pro kvalitativní analýzy proteinů za použití různých technik. Patří mezi ně reakce:

• biuretové s výskytem fialové barvy;
• ninhydrinem pro vytvoření modrofialový roztok;
• formaldehyd se zřízením červené barvy;
• Nogiér k vysrážení šedo-černé barvy.

Při provádění každé metoda se ukázala přítomnost bílkovin a přítomnost určitých funkčních skupin v molekule.

Tam ksantoproteinovaya reakce na protein. To je také nazýváno rozdělení Mulder. To se vztahuje na barevné reakce pro proteiny, ve kterých jsou aromatické a heterocyklické aminokyselin.

Funkce takového postupu vzorku je nitrace kyselinou dusičnou zbytky cyklických aminokyselin zejména přistoupení nitroskupiny na benzenový kruh.

Výsledkem tohoto procesu je vznik nitrosloučeniny, která se vysráží. Jedná se o základní funkce ksantoproteinovaya reakce.

To, co určuje aminokyselinu

Ne všechny aminokarboxylové kyseliny může být detekován s použitím takového vzorku. Hlavním rysem reakce detekce ksantoproteinovaya proteinů - přítomnost benzenovým kruhem nebo heterocyklickým kruhem v molekule aminokyselin.

Vzhledem k tomu, že protein je izolován od aminokarboxylových kyselin dvou aromatických, ve kterých je fenylová skupina (fenylalanin), a hydroxyfenyl radikál (v tyrosinu).

S ksantoproteinovaya reakce se stanoví heterocyklickou aminoskupinu tryptofan kyseliny, indol, který má aromatické jádro. Přítomnost výše uvedených sloučenin v proteinu dává charakteristickou změnu barvy zkušebního prostředí.

K čemu činidla

Pro provádění reakce ksantoproteinovaya třeba připravit 1% roztok ve vaječné bílkoviny, nebo rostlinného původu.

Obvykle se používá vejce, která je rozdělena na další separaci proteinu z žloutku. Pro 1% roztoku proteinu se zředí v množství desetinásobného čištěné vody. Po rozpuštění výsledné proteinové kapaliny by měl být filtrován přes několik vrstev tenká. Toto řešení by měly být skladovány na chladném místě.

Je možné provádět reakci s rostlinné bílkoviny. Pro přípravu roztoku se používá pšeničnou mouku v množství 0,04 kg. 0,16 l čištěné vody. Složky byly smíchány v baňce, která je vázána na 24 hodin v chladu při teplotě asi + 1 ° C Na konci dne se roztok míchá, načež následuje filtrace jeho první vatou a pak - papírový skládaný filtr. Výsledná kapalina se udržuje v chladu. Toto řešení je přítomen převážně ve frakci albuminu.

Při provádění reakce ksantoproteinovaya jako hlavní činidla použity koncentrované kyseliny dusičné. Další činidla je 10% roztok hydroxidu sodného nebo amoniaku, želatinového roztoku a nekoncentrované fenolu.

Metodika

V čisté zkumavky se provádí 1% roztok proteinu tý vejce nebo mouky v množství 2 ml. K tomu se přidá asi 9 kapek koncentrované kyseliny dusičné do vločkování zastavil. Výsledná směs se zahřívá, což vede k žluté sraženiny postupně mizí a jeho barva přechází do roztoku.

Když kapalina ochlazuje v trubici podél stěny přidá asi 9 kapek hydroxidu sodného, koncentruje se, což je přebytek pro proces. Reakční směs se stane alkalické. Obsah stane oranžovou barvu ve zkumavce.

Vlastnosti

Vzhledem k tomu, ksantoproteinovaya nazývá kvalitativní reakci na kyselinu dusičnou působením proteinů, vzorek se provádí za součástí digestoři. Při práci s koncentrovanými žíravin dodržovat všechna bezpečnostní opatření.

Uvolnění obsahu z trubice může nastat během procesu ohřívání, které se musí brát v úvahu při upevnění v držáku a výběru sklon.

Volba koncentrované kyseliny dusičné a hydroxidu sodného by se pouze s použitím skleněné pipety a hrušky gumovou zakázanou pipety ústy.

Relativní reakce s fenolem

Pro upřesnění, proces a potvrzení přítomnosti fenylových skupin se provádí podobným vzorku hydroxybenzen.

Trubka výrobu 2 ml zředěného fenolu, pak postupně podél stěny, byly přidány 2 ml koncentrované kyseliny dusičné. Tento roztok se podrobí ohřevu, čímž se stává žluté. Tato reakce je kvalita přítomnosti benzenový kruh.

Proces hydroxybenzen nitruje kyselinou dusičnou následným vytvořením směsi p-nitrofenolu a o-nitrofenolu v procentech 15 až 35.

Srovnávací test s želatinou

K prokázání, že ksantoproteinovaya reakce na protein ukazuje, aminokyseliny s aromatickou strukturou, pouze proteiny, které nemají fenolovou skupinu.

V čisté zkumavky se provádí 1% roztoku želatiny v množství 2 ml. K tomu se přidá asi 9 kapek koncentrované kyseliny dusičné. Výsledná směs se zahřeje. Roztok se nebarvené žlutě, což dokazuje nepřítomnost aminokyseliny s aromatickou strukturou. Někdy dochází k mírnému žloutnutí životního prostředí v důsledku přítomnosti proteinových nečistot.

chemické rovnice

V dvoustupňová reakce běží ksantoproteinovaya proteiny. Vzorec První způsob nitrace fáze popisuje aminokyselinové molekuly kyseliny za použití koncentrované kyseliny dusičné.

Příkladem je připojení nitroskupiny na tyrosinu za vzniku nitrotyrosinu a dinitrotirozina. V prvním případě na benzenovém kruhu je připojen jeden NO ₂ -radical, a druhá látka má dva atomy vodíku jsou nahrazeny NO _2. Chemický vzorec ksantoproteinovaya tyrosin reakce reprezentovány reakcí s kyselinou dusičnou za vzniku nitrotyrosinu molekuly.

Nitrace proces je doprovázen přechodu bezbarvé barvení ve žlutém tónu. Při provádění této reakce se proteiny, obsahující aminokyselinové zbytky fenylalaninu nebo tryptofanu, a barva roztoku změní.

Druhým krokem je reakční produkt nitrace tyrosinových molekul, zejména nitrotyrosin, s amoniem nebo hydroxidu sodného. Výsledkem je sodná nebo amoniová sůl, ve kterém žluto-oranžová barva. Taková reakce je spojena s možností molekul nitrotyrosinu pohybovat v chinoidní formě. Následně sůl, kterou tvoří kyselina nich Nitronic, který má chinon systém konjugovaných dvojných vazeb.

Takto končí ksantoproteinovaya reakci na proteiny. Rovnice uvedené výše druhém kroku.

Výsledek

Při analýze tekutin obsažených ve třech trubkách, je referenční roztok se zředí s fenolem. Látky s benzenovým kruhem poskytnout kvalitativní reakci s kyselinou dusičnou. V důsledku toho se změní barvu roztoku.

Jak je známo, želatina obsahuje hydrolyzovanou formu kolagenu. Protein neobsahuje aromatickou strukturu aminokyselin. Žádná změna v barvě média reakcí s kyselinou.

Ve třetí zkumavce je pozitivní reakce na bílkoviny ksantoproteinovaya. Závěr lze vyvodit následující: všechny proteiny s aromatickou strukturou, ať se jedná o fenylovou skupinu nebo indolový kruh, vzhledem ke změně barvy roztoku. To je vzhledem k tvorbě nitrosloučenin s žluté barvy.

Provedení barevnou reakci dokazuje přítomnost různých chemických struktur v aminokyselin a bílkovin. Příklad želatina ukazuje, že jeho složení zahrnuje kyselinu aminokarboxylové není mající fenylovou skupinu nebo cyklickou strukturu.

S ksantoproteinovaya reakci lze vysvětlit zežloutnutí pokožky, když na něj působí silnou kyselinou dusičnou. Stejnou barvou bude napěněné mléko během jejího podobnou analýzu.

V klinické laboratorní praxi je tento barevný vzorek není používán pro detekci proteinu v moči. Toto je kvůli žluté barvě samotného moči.

Ksantoproteinovaya reakce se stále více používají pro kvantifikaci aminokyselin, jako je tryptofan a tyrosin, jako součást různých proteinů.